科技名词
酶免疫分析
enzyme immunoassay,EIA
定义:在放射免疫分析的基础上发展起来的一种免疫分析方法。以酶标记抗体(抗原)作为主要试剂,代替了放射性同位素标记物,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来。
学科:核医学_核医学设备与操作_非显像核医学技术_核医学体外分析
相关名词:酶 抗原 抗体
【延伸阅读】
酶免疫分析代表了这样一类免疫分析方法,它利用酶催化底物的反应产生有色的、发光的或荧光的产物而被检测。根据酶的放大效应可以建立多种灵敏的分析方法,如可以利用简单的肉眼观测(定性的)或测定终点产物的吸光度(定量的)。根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的和游离的酶标记物,酶免疫分析分为均相和多相两种类型。
均相酶免疫分析基于标记抗原与抗体结合时会引起酶活性的改变:当抗体与酶和抗原的结合物结合时,酶的活性被抑制;当有半抗原存在时,由于它与抗体的结合减少了抗体与酶和抗原结合物的结合,因而抗体对酶活性的抑制减小。很显然,酶的活性直接正比于未标记抗原的量。这种分析方法因不需要分离而快速,一般只需2~3分钟。但它的灵敏度比多相酶免疫分析要低得多,因此其主要应用于治疗药物的监测。
多相酶免疫分析使用较多,其中应用最广泛的是酶联免疫吸附分析(ELISA)。酶联免疫吸附分析属于试剂过量分析法,结合相酶标试剂的量直接正比于待测目标抗原的浓度。固相试剂用来分离游离的和结合的酶标记物,同时也加速每一步骤后过量试剂的去除。
酶标反应是酶免疫分析中非常重要的组成部分。尽管有多种反应可用于酶标记,但可利用的反应功能基(如氨基、醛基、巯基、二硫化物及活化或非活化羧基等)却很有限。酶与其他物质间的交联是共价的。因为每步交联反应会形成非均一的结合物,所以反应之后一般要经过纯化,除去未标记的分子,提高酶免疫分析的灵敏度。