科技名词

菌种保藏

culture preservation

定义：用适宜方法将微生物的代谢速率降至最低，使其长期存活、不被污染、不易衰退、原有生物学特性稳定，便于以后使用的储存过程。

学科：微生物学_微生物学技术

相关名词：斜面保藏 冷冻干燥保藏法 液氮保藏 菌悬液

【延伸阅读】

菌种保藏是指保持微生物菌株原有的各种特征和生理活性的技术，其原理是根据微生物生理生化特点，人为创造环境条件，使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制、生命活动处于半永久性休眠的状态。常用的菌种保藏方法有斜面保藏法、冷冻干燥保藏法、液氮保藏法、砂土管保藏法和琼脂穿刺保藏法等。

斜面保藏法是将菌种接种在适宜的斜面培养基上，待菌种生长完全后，置于4℃冰箱中保藏，适用于细菌、酵母、放线菌、霉菌的短期保藏。斜面保藏法方法简单、菌种存活率高，但其缺点是菌株仍有一定强度的代谢活动，因此保存时间不长、传代多、菌种容易变异。

冷冻干燥保藏法是用保护剂制备菌悬液，将菌悬液快速降温冻结，再通过减压抽真空使冻结物中的水分升华成水蒸气排出（脱水干燥），在真空状态下立即密封瓶口，管内呈真空状态，最后将密封瓶置于低温保藏。此方法广泛适用于细菌、酵母、霉菌孢子、放线菌孢子和病毒等的保藏，保存期可达一至数十年之久，并且存活率高、变异率低。此方法的缺点是步骤较多、较烦琐。

液氮保藏法是利用液氮（-196℃）的超低温环境来保藏微生物的方法。‌微生物在低于-130℃的低温下新陈代谢趋于停止，通过添加保护剂如甘油或二甲基亚砜可保护微生物细胞，使其在超低温环境下保持活性。‌液氮保藏法是目前保存微生物菌种最可靠的方法。

砂土管保藏法是一种适用于生长孢子或芽孢的厌氧菌的保藏方法。该方法利用砂土中的水分和营养成分提供菌种生长的微环境，同时隔绝空气，保持菌种的厌氧状态。该方法操作简单，将保藏菌种接种于斜面培养基上，经培养后制成孢子悬液，将孢子悬液滴入已灭菌的砂土管中，孢子吸附在沙子上，再将砂土管置于真空干燥器中吸干水分，密封后置于-4℃冰箱中保藏。

（延伸阅读作者：东北师范大学生命科学学院 张帆博士）