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盐析

salting-out

定义：增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低的现象。是蛋白质分离纯化中经常使用的方法，最常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等。

学科：生物化学与分子生物学_方法与技术

相关名词：透析 等电点 饱和度

【延伸阅读】

盐析法是蛋白质和酶分离纯化中广泛使用的方法。

在浓度高的盐溶液中，蛋白质的溶解度会随着盐浓度的升高而降低，并以沉淀的形式析出，这就是盐析。盐析的作用是盐类使蛋白质脱去水化膜，同时压缩蛋白质分子周围的双电层，致使蛋白质分子相互聚集而沉淀。在合适的盐浓度下，不同蛋白质的溶解度不同。在混合溶液中分离几种蛋白质时，随着盐的饱和度逐渐增加，溶解度低的蛋白质首先沉淀析出；将其分离后，继续增加盐的饱和度，使第二种蛋白质沉淀析出；以此类推。上述的操作过程称为分段盐析。

盐析过程中需要注意以下几个问题：（1）盐类的选择。盐析时常用中性盐类，如硫酸铵、硫酸钠、亚硫酸钠、氯化钠等，其中最常用的是硫酸铵。硫酸铵的优点是不会引起蛋白质变性，溶解度大（在此溶解度范围内，许多蛋白质都可以分段盐析出来），同时溶解度受温度的影响小，缺点是干扰蛋白质氮含量的测定。（2）温度。一般盐析操作可以在室温下进行，但某些对热敏感的蛋白质宜在低温下进行，通常为3～4℃左右。（3）pH值。蛋白质在溶液中有两性电离现象，当其在等电点时溶解度小，容易析出，所以盐析常选择pH在蛋白质等电点进行，但在高浓度盐溶液中，蛋白质的等电点会发生变化，应加以注意。（4）蛋白质浓度。在相同盐析条件下，蛋白质浓度越大越易产生沉淀，但浓度过高易使其他杂蛋白共沉淀。因此，必须根据具体情况选择蛋白质溶液的浓度。（5）脱盐。用盐析法分离纯化蛋白质后，常需要脱盐才能获得纯品，脱盐常用透析法或凝胶过滤法。